分光光度计是化学检验中用于定量分析微量组分的核心仪器，广泛应用于水质、食品、环境等领域。正确、规范地使用该仪器，是确保检测数据准确可靠的前提。化学检验员必须掌握其完整操作流程，并养成良好的使用习惯。

使用前，首先进行环境与仪器状态检查。仪器应放置在稳固、无振动、避光、温湿度适宜（通常15–30℃，相对湿度<80%）的实验台上。开机预热至少15–30分钟，使光源和检测器稳定。检查比色皿是否洁净、无划痕、无指纹，尤其光学面需用镜头纸或无绒软布轻轻擦拭。确认所用比色皿材质匹配测定波长：紫外区（<400 nm）必须使用石英比色皿，可见光区可使用玻璃或塑料皿，严禁混用。

第二步是参数设置与空白校正。根据标准方法设定测定波长（如测六价铬为540 nm），选择吸光度（A）模式。取一支装有空白溶液（通常为纯水或不含待测物的试剂空白）的比色皿，擦净外壁，放入样品室指定位置，关闭盖子。按“调零”或“空白”键，仪器自动将此溶液的透射光强度设为100%（吸光度为0）。此步骤至关重要，用于扣除溶剂、试剂及比色皿本身的吸收干扰。

第三步是标准曲线的绘制。依次测定一系列已知浓度的标准溶液（通常5–6个点，含零浓度点）。每次更换溶液前，应用待测液润洗比色皿2–3次，避免交叉污染。读取吸光度值后，记录浓度与对应吸光度。所有标准点应在同一次开机、同一套比色皿、相同条件下完成。通过仪器自带软件或Excel绘制标准曲线，要求相关系数R²≥0.999。若线性不佳，应检查显色反应是否完全、标准溶液是否配制准确或是否存在基质干扰。

第四步是样品测定。将处理好的样品溶液注入洁净比色皿，同样润洗后放入样品室。读取吸光度值，仪器可自动根据标准曲线计算浓度。每批样品应包含平行样（至少双份）和质控样（如标准物质或加标回收样）。若样品吸光度超出标准曲线范围（通常A>1.0时偏离朗伯–比尔定律），必须稀释后重新测定，并在记录中注明稀释倍数。

测定完成后，立即清洗比色皿。先用自来水冲洗，再用少量去离子水润洗2–3次，倒置于晾干架上自然干燥。切勿用烘箱烘干或硬物刷洗内壁。关闭仪器电源，填写使用记录，包括日期、检测项目、波长、标准曲线信息、异常情况等。

日常维护方面，应定期清洁样品室，防止灰尘积累；避免频繁开关机；长时间不用时加盖防尘罩。每年应由计量部门对波长准确度、吸光度重复性、杂散光等关键指标进行检定或校准，并保留证书。

常见问题处理：若基线不稳，检查光源是否老化或电压波动；若空白吸光度异常高，排查试剂污染或比色皿未洗净；若标准曲线弯曲，考虑浓度过高或显色条件失控。任何异常均应停止检测，排查原因并记录。

总之，分光光度计虽操作简便，但细节决定成败。从比色皿的擦拭到空白的校正，从标准曲线的线性到样品的稀释，每一个环节都关乎数据质量。化学检验员唯有以严谨的态度、规范的操作，才能让这台“看得见颜色的天平”真正称量出科学与信任。